ELISA“花板”---看過之后，您再也不用擔心了

發布時間：2020-07-03 點擊次數：2207次

在ELISA實驗過程中時常會出現我們時常說的"花板"現象，這種現象影響檢驗結果的正確判讀，對工作造成一定的不利影響。

一旦出現“花板”，實驗結果必須放棄，不僅浪費物料和時間，而且還會出現樣本量缺少、交叉污染、報告延遲等一系列問題。?

所謂“花板”，就是空白、陰性、陽性對照及室內質控孔結果正常，而標本孔的OD值卻偏高，弱陽性結果較多?

“花板”現象的出現，往往會給實驗者判讀結果帶來麻煩。仁捷生物對“花板”現象進行了分析和總結，認為花板原因大多在樣品，解決辦法主要在洗滌，孵育和顯色過程也會導致。

花板原因大多在樣品

“花板之所以空白、對照及質控結果正常而標本孔異常，是因為樣品本身的原因，大部分或全部標本孔的OD值偏高，很可能是因為樣品中某些共有的物質非特異性的吸附于固相載體，而在實驗的過程中未被除去。

待測血清中混有紅細胞或纖維蛋白原這兩種物質易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈。實驗中，在較高的離心轉速（3000 /min）和較長的離心時間（>10 min）之下，血液標本被充分地離心分離之后，使紅細胞和纖維蛋白充分沉淀，可以在加樣時避免加入紅細胞和纖維蛋白，避免這兩種干擾物質對實驗結果的影響，就可避免“花板”情況。

解決辦法主要在洗滌

聚苯乙烯因其具有較強的吸附蛋白質的性能而被廣泛用于ELISA實驗的固相載體，聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，因此需要通過洗滌清除在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻決定著實驗的成敗。

血清中存在紅細胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時得到控制，同樣也可以通過適當增加洗滌次數和浸泡時間減輕或避免對實驗結果的影響。同樣，對于血液存在的非特異性的IgG很難在加樣時將其去除，那么解決的Z佳時機就是洗滌過程。

在ELISA實驗過程中時常會出現我們時常說的"花板"現象，這種現象影響檢驗結果的正確判讀，對工作造成一定的不利影響。

一旦出現“花板”，實驗結果必須放棄，不僅浪費物料和時間，而且還會出現樣本量缺少、交叉污染、報告延遲等一系列問題。

所謂“花板”，就是空白、陰性、陽性對照及室內質控孔結果正常，而標本孔的OD值卻偏高，弱陽性結果較多。