ANG-2，血管生成素2檢測方法（人ELISA）
發布時間：2019-04-16 點擊次數：1962次
人血管生成素2（ANG-2）ELISA試劑盒
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人血管生成素2（ANG-2）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人血管生成素2（ANG-2）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
試劑盒性能
- 檢測范圍：0.75 ng/mL – 24 ng/mL。
- 靈敏度：低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
- 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
- 重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% 。
操作步驟
注意事項
- 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
- 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
- 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
- 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。
- 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
- 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
- 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
- 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
- 不能使用過期產品。
- 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
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